Prueba de

Coombs

Historia de la prueba de Coombs:

La prueba de Coombs primero fue descrita en el año de 1945 por un inmunologista llamado Robín Coombs (después de quién se nombra) de Cambridge y Arturo Mourant que

colaboro en esta. Históricamente, esta prueba se realizo in vitro. Es una prueba que busca anticuerpos que puedan fijarse a los glóbulos rojos y causar su destrucción prematura (hemólisis).

FUNDAMENTO.- Permite demostrar la presencia de anticuerpos incompletos mediante el uso de un segundo anticuerpo, que es una antiglobulina.

Hay dos formas de realizar la prueba de Coombs: directa e indire

cta.

La prueba de Coombs directa se utiliza para detectar anticuerpos que ya se han fijado a la superficie de los glóbulos rojos. Muchas enfermedades y fármacos (quinidina, metildopa y procaina

mida) pueden llevar a la producción de estos anticuerpos. Estos anticuerpos algunas veces destruyen los glóbulos rojos y causan anemia. Esta prueba algunas veces se lleva a c

abo para diagnosticar la causa de anemia o ictericia.

La prueba de Coombs indirecta busca anticuerpos circulantes l

ibres contra una serie de glóbulos rojos estandarizados. Esta prueba

indirecta sólo se usa rara vez para diagnosticar una afección médica y, con más frecuencia, se utiliza para determinar si una persona podría tener o no una reacción a una transfusión de sangre.

PRUEBA DE COOMBS O PRUEBA DIRECTA

La prueba directa detecta Ac ya fijados a los hematíes y para ello

se enfrentan los hematíes del paciente con antiglobulina. Se utiliza para detectar la enfermedad hemolítica del recién nacido y para otras anemias hemolíticas

El suero de Coombs puede ser de dos clases: poliespecífico, si está dirigido contra la Ig G y el componente C3d del complemento, y monoespecifico, si solo está dirigido contra la Ig G y algunos de los componentes del complemento.

MATERIAL:

· Gradilla.

· Centrifuga.

· Tubos de ensayo.

· Suero fisiológico.

· Pipetas Pasteur.

· Suero Coombs.

· Suspensión de hematíes problema

TÉCNICA

 Preparar una suspensión al 5% en solución salina.

 Colocar 1 gota de suero de Coombs en 1 tubo.

 Añadir 1 - 2 gotas de la suspensión.

 Mezclar y centrifugar 1-2 min. a 2000 r.p.m.

 Sacar de la centrifugadora y resuspender el botón celular y observar si hay o no aglutinación.

ü Si hay aglutinación, hay Ac incompletos

VALORES NORMALES

La falta de agrupación de células (aglutinación), indicando que no hay anticuerpos para los glóbulos rojos, es lo normal.

Los rangos de los valores normales pueden variar ligeramente entre diferentes laboratorios. Hable con el médico acerca del significado de los resultados específicos de su examen.

Una prueba de Coombs directa anormal (positiva) significa que usted tiene anticuerpos que actúan contra sus glóbulos rojos, lo cual puede deberse a:

• Anemia hemolítica autoinmunitaria sin otra causa
• Leucemia linfocítica crónica u otro trastorno linfoproliferativo
• Anemia hemolítica inducida por fármacos (muchos fármacos han sido asociados con esta complicación)
• Eritroblastosis fetal (enfermedad hemolítica del recién nacido)
• Mononucleosis infecciosa
• Infección por micoplasma
• Sífilis
• Lupus eritematoso sistémico u otra afección reumatológica
• Reacción a transfusión como la ocasionada por unidades de sangre cotejadas de manera impropia

Esta prueba también es anormal en algunas personas sin una causa clara, especialmente entre los ancianos. Hasta el 3% de las personas que están hospitalizadas sin un trastorno sanguíneo conocido tendrán un resultado anormal en la prueba de Coombs directa.

PRUEBA INDIRECTA DE LA ANTIGLOBULINA HUMANA O TEST DE COOMBS INDIRECTO

Fundamento

Se pretende detectar generalmente la presencia en el suero del enfermo de Ac incompletos libres.

Se incuba el suero del paciente con unos hematíes tipo (GR que no tienen adheridos a su superficie ningún tipo de Ig y ningún componente del complemento)

La finalidad de esta incubación consiste en lograr una sensibilización in Vitro de los hematíes tipo por parte de los Ac incompletos que pueden estar contenidos en el suero problema. Los hematíes tipo que se suelen utilizar con los 0+.

MATERIAL

· Gradilla. Centrifuga.

· Tubos de ensayo.

· Solución salina.

· Pipetas Pasteur.

· Suero Coombs.

· Suspensión de hematíes al 5%

TÉCNICA

 Preparar una suspensión de hematíes tipo al 5% en solución salina.

 Colocar en 1 tubo 2 gotas de los hematíes tipo y 2 gotas de suero problema.

 Mezclar e incubar a 37ºC durante 30 min.

 Lavar 3 veces el producto incubado en solución salina.

 Tras el último lavado resuspender el sedimento de hematíes.

 Añadir 2 gotas del suero Coombs.

 Mezclar bien y centrifugar a 2000 r.p.m. 1-2 min.

 Agitar el tubo y observar si hay o no aglutinación.

RESULTADOS

ü Si existe aglutinación tiene Ac - incompletos.

ü Si no existe aglutinación no tiene Ac – incompletos

VALORES NORMALES

Una prueba de Coombs indirecta anormal (positiva) significa que usted tiene anticuerpos que actuarán contra los glóbulos rojos que el cuerpo asume como extraños. Esto puede sugerir la presencia de:

• Anemia hemolítica autoinmunitaria o inducida por fármacos
• Eritroblastosis fetal (enfermedad hemolítica)
• Incompatibilidad sanguínea (cuando se utiliza en bancos de sangre)